寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织有氧糖酵解抑制的影响

目的 观察寿胎丸防治复发性流产（RSA）的作用,探讨其调控有氧糖酵解的作用。方法 将40只CBA/J小鼠随机分为正常组、RSA组、地屈孕酮组和寿胎丸组,每组10只,分别灌胃蒸馏水、地屈孕酮溶解剂、寿胎丸14天。14天后将正常组CBA/J雌鼠与BALB/c雄鼠2∶1合笼,其余3组雌鼠与DBA/2雄鼠2∶1合笼,建立RSA模型,并按照前法继续灌胃至见栓第10天。计算各组小鼠胚胎丢失率,HE染色观察蜕膜组织,Western Blot、实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测小鼠蜕膜组织己糖激酶（HK）2、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、乳酸脱氢酶（LDH）A、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达,乳酸脱氢酶比色法检测乳酸（LA）含量,检测HK、PK、LDH活性。结果 与正常组比较,RSA组小鼠胚胎丢失率升高（P<0.05）,蜕膜组织细胞减少,排列疏松,胞浆空泡样变,部分细胞核消失,蜕膜组织HK2、PKM2、LDHA、Bcl-2蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）,Bax、Caspase-3蛋白...     

手机频率电磁辐射对大鼠睾丸超微结构损伤的研究

目的:观察手机频率(900 MHz)电磁辐射对雄性大鼠睾丸组织超微结构和生精细胞凋亡的影响。方法:将30只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、辐射2 h组和辐射4 h组,每组10只。正常组不辐射,辐射2 h组和辐射4 h组每天暴露于900 MHz手机频率分别辐射2、4 h,连续辐射30 d。透射电镜观察睾丸组织超微结构的变化,原位末端标记(TUNEL法)检测生精细胞凋亡。结果:与正常组比较,辐射2 h组大鼠生精小管基膜肿胀,支持细胞紧密连接分开,细胞间隙明显增大,部分线粒体内出现空泡,见线粒体髓样化,生精细胞凋亡增多[(25.62±1.33)%vs(18.71±1.76)%,P0.05],以初级精母细胞凋亡为主;与辐射2 h组比较,辐射4 h组生精小管基膜肿胀,支持细胞紧密连接分开,细胞间隙明显增大,精原细胞胞膜不完整,可见胞质碎片、胞核固缩和切迹,核周隙轻度扩张,细胞内线粒体畸形,内有空泡,结构模糊,部分嵴融合或消失,其损伤程度增加,生精细胞凋亡增多[(29.93±1.46)%vs(25.62±1.33)%,P0.05],精原细胞、初级精母细胞和次级精母细胞均有凋亡。结论:手机频率电磁辐射可造成大鼠睾丸组织超微结构损伤,生精细胞凋亡增加,有时效关系;生精细胞凋亡可能与线粒体损伤有关。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响

目的：研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法：将50只SPF级8～10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果：模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P<0.05),PKCα的蛋白表达水平无明显变化。结论：补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。     

补肾调经方通过有氧糖酵解促进控制性超促排卵小鼠囊胚发育的实验研究

目的?观察补肾调经方对囊胚质量的影响及与有氧糖酵解相关基因表达的关系。方法?将100只动情周期正常的费城癌症研究所（ICR）雌性小鼠按照随机数字表法分为4组，分别为正常组、模型组、补肾低剂量组、补肾高剂量组，每组25只。除正常组，其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。正常组及模型组雌鼠每日上午 9：00灌胃蒸馏水，补肾低、高剂量组雌鼠每日上午9：00灌胃补肾调经方低、高剂量（2.6、5.2 g/mL），连续 10 日。模型组及补肾低、高剂量组于第 11 日下午 16：00 同时腹腔注射孕马血清促性腺激素（PMSG）10 IU/只，48 h 后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）10 IU/只；正常组于第11日下午16：00 腹腔注射生理盐水 0.1 mL。连续3个周期，每次间隔4天。模型组及补肾低、高剂量组均在控制性卵巢刺激（COS）第 3 次腹腔注射 HCG 后（下午 16：00）立即与雄性小鼠合笼。正常组在动情期第 3 次腹腔注射生理盐水后（下午 16： 00）立即与雄性小鼠合笼。次日清晨检查阴栓，见栓的雌鼠记为妊娠。妊娠第4天（注射HCG后96 h）在体式显微镜下取出囊胚，观察囊胚质量并计数，计算优质囊胚率；免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测囊胚中的乳酸脱氢酶（LDH）、M2-型丙酮酸激酶（PKM2）、葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、单羧酸转运蛋白4（MCT4）蛋白及mRNA的表达。结果?与正常组比较，模型组的囊胚数量增加（P<0.05），优质囊胚率降低（P<0.05），囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及mRNA表达均降低（P<0.05）；与模型组比较，补肾低、高剂量组的优质囊胚率升高（P<0.05），囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及mRNA表达均升高（P<0.05）。结论?补肾调经方可增加超促排卵小鼠囊胚数量，提高小鼠囊胚质量，促进胚胎植入，其机制可能与上调有氧糖酵解改善早期胚胎能量代谢有关。